原生质体分离

原生质体分离

原生质分离：酶（纤维素酶，离析酶）

步骤：叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基→除去小的个体，用血球计计数→调整到合适的密度重悬浮于培养基。

原生质体的培养：

培养基：MS＋NAA 2.0ppm＋BA 0.5ppm＋3％蔗糖＋9％甘露醇

注意：1、原生质体分离后，非常脆弱，需要渗透压保护剂的保护直到细胞壁形成。

2、针对不同的研究对象，培养基中生长素和细胞分裂素的水平要做适当调整。

影响原生质体培养的因素：营养需求（NH4＋不能过多），渗压剂，培养密度（105/mL），

贮藏条件（通常在黑暗处）。

培养方法：液体基质培养法，半液体基质培养法，固体基质培养法，看护培养。

固体培养的步骤：原生质体移入培养基→1体积含原生质体的培养基与1体积含琼脂糖（40℃）的培养基混和→倒转培养皿在25℃下培养→原生质体重新产生细胞壁并分裂成细

胞团→细胞团于琼脂糖基质中传代培养，培养基中应减少渗压剂以利于愈伤组织的形成→诱导分化成植物的根，茎。

原生质体分离培养的意义：1、除去了细胞壁为植物细胞之间的融合扫平了障碍，同时叶为制造新杂种开辟了道路。2、原生质体可摄入外源DNA，细胞器、细菌或病毒颗粒，这些特性与植物全能性相结合为高等植物的遗传饰变打下基础。3、获得细胞无性系和选育突变体的优良起始材料。

路由器对分离器怎么接？

分离器和猫连接方法如下图：

猫连接路由器部分如下图：

分离机原理：ADSL是利用频分复用的技术把普通电话线路所传输的低频信号（0.3 - 3.4KHz）和高频信号（4.0-1000KHz）分离。3400Hz以下供电话使用；3400Hz以上的高频部分供上网使用。